Před inseminací je kráva fixována v kotci a toaleta (vnější genitál se omyjí tamponem, čistou teplou vodou z hrnku Esmarch, zavlažují roztokem furatsilinu nebo furazolidonu, otře do sucha) zevního genitálu. Poté si umyjí ruce a vydezinfikují je roztokem furatsilinu nebo alkoholem, otřou je tamponem, vezmou sáček s pipetami, otřou tamponem navlhčeným v 96% alkoholu, přestřihnou sterilními nůžkami nebo propíchnou roh sáčku konec pipety.
Po prodloužení pipety na 1/3 délky ji připojte k prázdné sterilní ampuli, jejíž víčko se nejprve odstřihne sterilními nůžkami, nebo ke sterilní injekční stříkačce pomocí pryžové nebo polyetylenové spojky nebo k balónku a úplně vyjměte pipetu. Roztržený sáček s pipetami se těsně po vyjmutí každé pipety zataví nad plamenem alkoholové lampy nebo zápalky. Vezměte ampuli se spermatem, otřete ji tamponem navlhčeným v 96% alkoholu, odřízněte ji ode dna a poté z ní odsajte sperma do pipety, vymáčkněte a uvolněte připojenou prázdnou ampuli.
Pokud se sperma dodává nebo rozmrazuje (granule) v lahvičkách, odebere se 0,5 – 1,0 ml z lahvičky do pipety. (před nasátím do pipety je nutné spermie promíchat opatrným otáčením ampule nebo lahvičky).
Při dodání v kapilárních brčkách (payettech) se rozmrazí, poté se otevřený konec kapiláry připevní pomocí polyetylenové spojky ke zkrácené polystyrénové pipetě napojené na injekční stříkačku a volný konec se propíchne sterilní jehlou.
Nástroje připravené k inseminaci jsou umístěny na sterilním stojanu. Na podložní sklíčko se vytlačí kapka spermatu, navrch se přiloží krycí sklíčko a pod mikroskopem se stanoví aktivita. Když je vše připraveno, palcem a ukazováčkem jedné ruky, oblečené v plastové rukavici, otevřete soukromé pysky zvířete a aniž byste se dotkli vnějších genitálií pipetou, vložte ji druhou rukou do pochvy, dokud nebude připojena ke stříkačce. (ampule, sprej).
Po zavedení pipety do pochvy se ruka v plastové rukavici navlhčí teplou vodou a zavede se do konečníku, druhou rukou se pipeta mírně posune do strany. Pokud se pipeta na cestě do poševní části děložního hrdla dostane do poševní rýhy, pak se děložní hrdlo s rukou zasunutou do konečníku posune mírně dopředu (směrem k hlavě zvířete), což vede k napětí v poševních stěnách a napřímení ze záhybů.
Poté, co se ujistíte, že konec pipety leží blízko otvoru děložního čípku, začněte vyšetřovat dělohu a vaječníky. Pokud je při vyšetření zjištěna březost nebo jsou zaznamenány abnormality na pohlavních orgánech, zvíře by nemělo být inseminováno. Konečnou diagnózu musí stanovit veterinární lékař.
Je třeba mít na paměti, že děložní čípek nemůže být fixován během období napětí střevní stěny, protože je možné poranění jeho sliznice nebo perforace. Uvolnění napětí dosáhneme lehkým hlazením sliznice.
Po vyšetření je vaginální část děložního čípku fixována celou rukou. V tomto případě je otevření děložního čípku cítit malíčkem nebo palcem a pipeta je nasměrována pod jeho kontrolou. Poté, co se ujistíte, že pipeta vstoupila do otvoru, opatrně lehkými rotačními pohyby, aby nedošlo k poškození příčných záhybů sliznice, se děložní čípek přetáhne přes pipetu. Po zasunutí pipety do hloubky 6–8 cm pomalu zatlačte na ampuli nebo píst katétrové stříkačky a zároveň pipetu mírně táhněte zpět. Poté, aniž byste otevřeli ampuli prsty nebo aniž byste vytáhli píst, se pipeta opatrně vyjme z pochvy a ruka z konečníku.
Při fixaci není možné uchopit tělo dělohy a ne samotný děložní čípek; V tomto případě poševní část děložního čípku spadne dolů a konec pipety je obtížné zasunout do jejího otvoru.
Pokud nejsou k dispozici jednorázové plastové nástroje, lze použít skleněné pipety s pryžovými zásobníky a gumové rukavice. Po použití se všechny tyto předměty důkladně umyjí a sterilizují ve vroucí vodě.
